وسایل مورد نیاز
بشر کوچک و بزرگ، آرد، آگار، شکر، مخمر، اسید پروپیونیک، آب مقطر، یک بطری شیر نیم لیتری
انواع محیط کشت که کاربرد وسیع دارند، عبارتند از:
۱- محیط کشت موز
۲- محیط کشت آرد ذرت همراه با آرد ملاس
۳- یولاف غلتک خورده
۴- محیط کشت عصاره گندم
طرز تهیه محیط کشت عصاره گندم
این محیط کشت، توسط اسپاسکی در دانشگاه کلمبیا تهیه شده و سالیان دراز است که با اطمینان مورد استفاده قرار می گیرد.
برای هر بطری ¼ لیتری، مواد مورد نیاز جهت تهیه محیط کشت عبارتند از:
۴۰ سی سی آب
۲/۵ گرم آرد
۱/۸ گرم مخمر
۱ گرم آگار
۰/۵ سی سی اسید پروپیونیک
نکته: گلوکز و مخمر جهت تغذیه، آرد گندم و آگار جهت قوام محیط کشت، تگوسپت-ام خاصیت قارچ کشی دارد، که به علت کمیاب و گران بودن از اسید پروپیونیک به جای آن استفاده می کنیم.
روش کار
۱- داخل بشر کوچک آرد، مخمر و شکر اضافه می کنیم و داخل بشر بزرگ آگار می ریزیم.
۲- با استوانه مدرج ۲۰ سی سی آب مقطر درون بشر کوچک می ریزیم و هم می زنیم تا حل شود.
۳- درون بشر بزرگ ۳۰ سی سی آب مقطر میریزیم و روی شعله قرار می دهیم. تا وقتی که رنگ محلول طلایی رنگ شود، به هم می زنیم تا به جوش بیاید.
۴- بعد از به جوش آمدن، بلافاصله محلول درون بشر کوچک را به بشر بزرگ اضافه می کنیم و می جوشانیم. بعد از جوشاندن کنار می گزاریم تا خنک شود.
۵- بعد از خنک شدن، درون ظرف محیط کشت قرار داده و برای درب آن از پنبه استفاده می کنیم.